পরীক্ষাগার ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামগুলি সম্পর্কে জানুন

দ্যক্রোমাটোগ্রাফিক কলামপৃথকীকরণ কৌশলটি মিশ্রণের মধ্যে স্থির পর্যায়ে এবং মোবাইল পর্বের মধ্যে বিভিন্ন পার্টিশন সহগের উপর ভিত্তি করে। স্টেশনারি ফেজটি সাধারণত একটি অ্যাডসরবেন্ট, যেমন সিলিকা জেল, অ্যালুমিনা, পলিমাইড ইত্যাদি, যা ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামে সমানভাবে পূর্ণ হয়। মোবাইল ফেজটি এমন দ্রাবক যা মিশ্রণটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামে নিয়ে আসে, এটি এলুয়েন্ট নামেও পরিচিত। ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামে মোবাইল ফেজটি চলার সাথে সাথে প্রতিটি উপাদান পার্টিশন সহগের পার্থক্যের কারণে বিভিন্ন সময়ের জন্য স্থির পর্যায়ে থাকে, যাতে বিচ্ছেদ অর্জন করতে পারে।

একটি গুরুত্বপূর্ণ বিচ্ছেদ সরঞ্জাম হিসাবে, ল্যাবরেটরি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম রাসায়নিক, জৈবিক, ফার্মাসিউটিক্যাল এবং অন্যান্য ক্ষেত্রে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। ক্রোমাটোগ্রাফির নীতির উপর ভিত্তি করে, মিশ্রণে প্রতিটি উপাদানগুলির পৃথকীকরণটি নির্দিষ্ট পর্যায়ে এবং মোবাইল পর্বের মধ্যে পার্টিশন সহগ, শোষণ ক্ষমতা এবং বিভিন্ন পদার্থের দ্রবণীয়তা ব্যবহার করে কার্যকরভাবে উপলব্ধি করা যায়। এই কাগজটি পরীক্ষাগার ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামের বিভিন্ন ক্ষেত্রে বিশদ নীতি, প্রকার, নির্বাচন পদ্ধতি, অপারেশন পদ্ধতি এবং প্রয়োগের প্রবর্তন করবে।

ল্যাবরেটরি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামগুলি তাদের ক্রিয়া, ভরাট উপাদান, আকার এবং আকার অনুযায়ী বিভিন্ন ধরণের মধ্যে বিভক্ত করা যেতে পারে।

Carty কর্মের নীতি অনুসারে শ্রেণিবিন্যাস

1) শোষণ কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি: মিশ্রণের প্রতিটি উপাদানগুলির সংশ্লেষ ক্ষমতার পার্থক্য পৃথক করতে অ্যাডসরবেন্ট ব্যবহার করা হয়। অ্যাডসরবেন্টের পছন্দটি পৃথক করার জন্য পদার্থের প্রকৃতির উপর নির্ভর করে, যেমন সিলিকা জেল নন-মেরু এবং মেরু যৌগগুলির পৃথকীকরণের জন্য উপযুক্ত এবং অ্যালুমিনা অ্যাসিড এবং ক্ষার অনুসারে বিভিন্ন ধরণের যৌগের জন্য উপযুক্ত।

2) পার্টিশন কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি: মিশ্রণটি স্থির এবং মোবাইল পর্যায়ের মধ্যে পার্টিশন সহগের পার্থক্য অনুযায়ী পৃথক করা হয়। পার্টিশন কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি সাধারণত মোবাইল ফেজ হিসাবে একটি দ্রাবক সিস্টেম ব্যবহার করে এবং দ্রাবকের রচনা পরিবর্তন করে পার্টিশন সহগকে সামঞ্জস্য করে।

3) আয়ন এক্সচেঞ্জ কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি: মিশ্রণে নির্বাচনী শোষণ এবং আয়নগুলির মুক্তি আয়ন এক্সচেঞ্জ রজন দ্বারা পৃথক করা হয়। আয়ন এক্সচেঞ্জ রজনগুলিতে নির্দিষ্ট আয়ন এক্সচেঞ্জ গ্রুপ রয়েছে যা পৃথক পদার্থে আয়নগুলি বিনিময় করতে পারে।

Pulling উপাদান পূরণ করে বাছাই করুন

1) সিলিকা জেল কলাম: সিলিকা জেল একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত বিজ্ঞাপনদাতা, বিভিন্ন জৈব পদার্থকে পৃথক করার জন্য উপযুক্ত। সিলিকন কলামগুলিতে দুর্দান্ত তাপ এবং রাসায়নিক স্থিতিশীলতা রয়েছে এবং এটি বিস্তৃত পিএইচ পরিসরে ব্যবহার করা যেতে পারে।

2) অ্যালুমিনা কলাম: অ্যালুমিনা কলাম অ্যাসিড এবং ক্ষার অনুসারে অ্যাসিডিক, ক্ষারীয় এবং নিরপেক্ষ অ্যালুমিনা কলামে বিভক্ত, বিভিন্ন ধরণের যৌগিক পৃথকীকরণের জন্য উপযুক্ত। অ্যালুমিনা কলামে মেরু পদার্থের জন্য শক্তিশালী শোষণ ক্ষমতা রয়েছে।

3) পলিমাইড কলাম: পলিমাইড কলামে শোষণ ক্রোমাটোগ্রাফি এবং পার্টিশন ক্রোমাটোগ্রাফির কার্যকারিতা রয়েছে এবং ফেনোলস, অ্যাসিড, কুইনোনস ইত্যাদির মতো পলিমাইডের সাথে হাইড্রোজেন বন্ড তৈরি করতে পারে এমন যৌগগুলির পৃথকীকরণের জন্য উপযুক্ত

◆ আকার এবং আকার দ্বারা বাছাই করুন

1) গ্লাস কলাম: স্বচ্ছতা এবং সহজ পর্যবেক্ষণের সুবিধার সাথে ল্যাবরেটরিগুলিতে সাধারণত ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামের ধরণ। কাচের কলামের আকার পৃথক করা সামগ্রীর পরিমাণ এবং পৃথকীকরণের অসুবিধার ডিগ্রি অনুসারে নির্ধারিত হয় এবং ব্যাস থেকে উচ্চতার অনুপাত সাধারণত 1: 8 থেকে 1:50 এর মধ্যে থাকে।

2) স্টেইনলেস স্টিল কলাম: স্টেইনলেস স্টিল কলামের জারা প্রতিরোধ এবং চাপ প্রতিরোধের সুবিধা রয়েছে যা উচ্চ চাপ ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেমের জন্য উপযুক্ত। স্টেইনলেস স্টিলের কলামগুলির ব্যবহার তুলনামূলকভাবে বিরল, তবে কিছু পরিস্থিতিতে সুবিধা রয়েছে।

কার্যকর পৃথকীকরণ অর্জনের জন্য একটি উপযুক্ত ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামের নির্বাচন গুরুত্বপূর্ণ। ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামগুলি নির্বাচন করার সময়, নিম্নলিখিত বিষয়গুলি বিবেচনা করা দরকার:

ল্যাবরেটরি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামগুলিতে বেশ কয়েকটি ক্ষেত্রে বিস্তৃত অ্যাপ্লিকেশন রয়েছে, তবে নিম্নলিখিতগুলির মধ্যে সীমাবদ্ধ নয়:

◆ প্রোটিন বিচ্ছেদ এবং পরিশোধন: ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামটি প্রোটিন পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন করার জন্য অন্যতম গুরুত্বপূর্ণ সরঞ্জাম। প্রোটিনের আকার, চার্জ সম্পত্তি এবং স্নেহের পার্থক্য অনুসারে বিভিন্ন ক্রোমাটোগ্রাফিক পদ্ধতিগুলি পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন করার জন্য নির্বাচন করা যেতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, আয়ন এক্সচেঞ্জ কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি চার্জ বৈশিষ্ট্য দ্বারা পৃথক প্রোটিনগুলির জন্য উপযুক্ত; অ্যাফিনিটি কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি লক্ষ্য প্রোটিনগুলি বিচ্ছিন্ন এবং শুদ্ধ করতে নির্দিষ্ট বাইন্ডিং বৈশিষ্ট্য ব্যবহার করে।

New নিউক্লিক অ্যাসিডের পৃথকীকরণ: ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামগুলি নিউক্লিক অ্যাসিডগুলি পৃথক করার জন্যও ব্যবহার করা যেতে পারে। নির্দিষ্ট ক্রোমাটোগ্রাফিক পদ্ধতির মাধ্যমে, বিভিন্ন দৈর্ঘ্য এবং কাঠামোর নিউক্লিক অ্যাসিড অণুগুলি (যেমন ডিএনএ খণ্ড এবং আরএনএ অণু) পরবর্তী নিউক্লিক অ্যাসিড বিশ্লেষণ, সিকোয়েন্সিং এবং অন্যান্য পরীক্ষার প্রয়োজনগুলি মেটাতে কার্যকরভাবে কলামে পৃথক করা যায়।

Mol ছোট অণু যৌগিক পৃথকীকরণ: ড্রাগ ইন্টারমিডিয়েটস, প্রাকৃতিক পণ্যগুলিতে ছোট অণু উপাদান ইত্যাদি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামগুলির সাহায্যে পৃথক করা যেতে পারে। স্থির পর্যায় এবং মোবাইল পর্বের মধ্যে পার্টিশন সহগের পার্থক্য অনুসারে, উপযুক্ত ক্রোমাটোগ্রাফিক পদ্ধতিটি ছোট অণু যৌগগুলির পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন করার জন্য নির্বাচন করা যেতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, বিপরীত-পর্বের সিলিকা জেল লাইপোফিলিক ছোট অণুগুলির পৃথকীকরণের জন্য উপযুক্ত; সাধারণ সিলিকা জেল হাইড্রোফিলিক ছোট অণুগুলির পৃথকীকরণের জন্য উপযুক্ত।

Po পলিস্যাকারাইডগুলির ভগ্নাংশ পৃথকীকরণ: ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামটি পলিস্যাকারাইডগুলির ভগ্নাংশ পৃথকীকরণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। পলিস্যাকারাইড অণু এবং ব্রাঞ্চযুক্ত চেইন কাঠামোর আকার অনুসারে, উপযুক্ত ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশলগুলি বিভিন্ন স্তরে পলিস্যাকারাইড মিশ্রণগুলি পৃথক করার জন্য নির্বাচন করা যেতে পারে, যা পলিস্যাকারাইডগুলির কাঠামো এবং ফাংশনের মধ্যে সম্পর্ক আরও অধ্যয়ন করতে সহায়ক।

◆ অন্যান্য অ্যাপ্লিকেশন: ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামগুলি কোষের ভাঙ্গনের পরে অন্তঃকোষীয় পণ্যগুলির পৃথকীকরণ এবং নিষ্কাশনেও ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, উদ্ভিদ নিষ্কাশনগুলিতে সক্রিয় উপাদানগুলির পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন, অ্যান্টিবায়োটিকগুলির পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন, এনজাইমগুলির পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন, অ্যান্টিবডিগুলির শুদ্ধকরণ, এবং ভাইরাসগুলির পৃথকীকরণ এবং ঘনত্ব। তদতিরিক্ত, ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামটি পেট্রোকেমিক্যাল পণ্যগুলির পৃথকীকরণ এবং বিশ্লেষণ, খাদ্য সংযোজনগুলির পৃথকীকরণ এবং সনাক্তকরণ, কসমেটিক কাঁচামালগুলির বিচ্ছেদ এবং পরিশোধন, পলিমার উপকরণগুলির শ্রেণিবিন্যাস বিশ্লেষণ এবং প্রাকৃতিক মশলাগুলির পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন ক্ষেত্রে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে।